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编号:13763484
大蒜素诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡的形态观察(1)
http://www.100md.com 2011年8月15日 刘英芹,姚海涛,王秀岩,张晓波,孙广臣
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    参见附件。

     【摘要】目的观察大蒜素对体外培养的肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制和诱导凋亡的作用。方法用形态观察、MTT和TUNEL检测等方法检测大蒜素对SMMC-7721细胞的生长抑制和诱导凋亡情况。结果大蒜素作用后SMMC-7721呈现出了明显的凋亡形态,凋亡小体集中出现后又迅速消失。凋亡指数由525上升至3061(P<005)。结论大蒜素对SMMC-7721细胞有显著的抑制生长和诱导凋亡的作用,光镜下的形态特征明显、独特。

    【关键词】大蒜素;细胞凋亡;肝癌

    大蒜(allium sativum)为百合科多年生草本植物大蒜的鳞茎,大蒜素(allicin)是从大蒜中提取的挥发性油状物,是二烯丙基三硫化物、二烯丙基二硫化物以及甲基烯丙基二硫化物等的混合物。中医药学认为大蒜有行滞气,暖脾胃,解毒杀虫之功效。近来研究表明,大蒜还具有降血脂、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤和提高免疫功能等多方面的作用。流行病学调查显示,大蒜产区和长期食用大蒜的人群,其癌症发生率偏低[1],因此有关于大蒜防癌、抗癌作用的研究日益受到关注。本实验采用形态学观察、MTT等方法,进行了大蒜素对体外培养的肝癌细胞的诱导凋亡作用的研究。

    1材料与方法

    11细胞培育细胞株:SMMC-7721肝癌细胞购自武汉冷藏中心;培养液:RPMI 1640培养基(GIBCO,USA);新生牛血清:购自杭州四季青生物工程公司;胰蛋白酶:025%胰酶,002%EDTA;CO2培养箱:IT-41,Japan;倒置相差显微镜:Olympus,Japan。

    12药品大蒜素注射液:上海禾丰制药厂;四甲基偶氮唑盐(MTT):SIGMA公司。用PBS配成5 mg/ml,除菌、分装后,4 ℃避光保存。96孔培养板:SIGMA公司;TUNEL检测试剂盒:华美生物公司。

    13MTT检测将浓度为5×104 个/ml的细胞接种于96孔细胞培育板中,每孔加100 μl,待细胞处于对数生长期时加大蒜素。实验组细胞加100 μl含大蒜素浓度依次为125、25、50、100、200 μg/ml的完全培养基,阴性对照组加100 μl完全培养基,空白对照组只有100 μl完全培养基,不含细胞,每浓度时间组设4复孔。继续培育2、24 h后 ......

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